特殊显微镜

		组织学的研究方法

几种特殊显微镜术　　3．荧光显微镜（fluorescence microscope）　　是用以观察细胞及组织内荧光物质的分布。它是装有、能产生紫外线（短波长）的光源及系列滤片装置的显微镜。由于紫外线的照射，标本中的荧光物质吸收光能后，呈现出不同颜色的荧光，这是自发荧光，如维生素A呈绿色荧光、心肌细胞内脂褐素呈棕黄色～金黄色荧光。但是,细胞内的某些成分只有与荧光素结合后，在紫外线的激发下，始可呈现一定颜色的荧光；如应吖啶橙（荧光素）处理细胞后，细胞核内的DNA呈绿～黄绿色荧光，细胞质及核仁内的RNA呈桔黄～桔红色荧光。利用荧光染色法及荧光显微镜可以观察组织、细胞的结构、细胞内某些成分含量的变化，并探讨细胞的功能状态。或用荧光素标记免疫球蛋白，进行免疫荧光细胞化学研究。　　4．暗视野显微镜（dark field microscope）　　特点是该显微镜具有暗视野聚光器，使光线不直接进人物镜，故呈暗视野。该显微镜适用于观察细胞内微小颗粒，例如线粒体、细菌运动等。　　5．共焦激光扫描显微镜（confocal laser scanning microscope， CLSM）　　是80年代初研制成功的一种高光敏度、高分辨率的新型仪器。它的主要特点是：①以激光作为光源。②采用共焦成像系统． ③扫描、显示及记录系统。激光具有发散角小、方向性好的优点，光束通过聚焦后落在样品（如细胞等）的不同深度；在不同方向、不同深度的平面上进行聚焦扫描，从而得到一系列不同层次的清晰图像。平面间隔最小约 600～800nm；利用微机图像合成系统可重建细胞的三维图像，可对细胞进行体视学的定量分析研究； CLSM可以更精确地检测、识别，组织或细胞内的微细结构及其变化。由此， CLSM又有细胞CT之称。